冻存很久的ELISA试剂盒（未过期），解冻后使用前需做哪些性能验证

  为确保冻存很久的ELISA试剂盒（未过期）解冻后检测结果的可靠性，需进行以下关键性能验证：

1、标准品稳定性验证：

如果试剂盒包含标准品，应先进行标准品的稳定性验证。按照说明书稀释标准品，并绘制标准曲线，检查线性范围、灵敏度和回收率。

2、特异性验证：

通过交叉反应实验验证试剂盒对目标蛋白的特异性，确保不会与非目标蛋白发生交叉反应。

3、重复性验证：

在同一实验条件下，使用同一批次试剂进行多次平行实验，计算板内和板间的变异系数（CV），确保结果的重现性。

4、灵敏度验证：

使用最低检测限标准品（如1.0AU/ml）进行检测，确认能否达到说明书标定的灵敏度。

5、线性范围验证：

用5-1000AU/ml浓度梯度的标准品检测，验证结果是否在说明书标定的线性范围内。

6、准确性验证：

使用已知浓度的质控品检测，结果偏差应在±10%内‌

7、稳定性验证

将ELISA试剂盒在2-10℃放置2小时后上机检测，确认机载稳定性（通常要求28天内有效）。

8、阳性对照和阴性对照验证：

使用已知阳性和阴性对照样本进行测试，确保试剂盒能够正确区分阳性与阴性结果。

注意事项‌：

1.所有验证需在试剂盒有效期内完成；

2.若出现沉淀、变色等异常应立即停用；

3.建议优先使用新批次试剂盒进行关键实验。

  通过以上步骤，可以全面验证冻存多年的ELISA试剂盒的性能，确保其在实验中能够提供可靠的结果。如果在验证过程中发现任何异常，应停止使用该批次试剂盒，并考虑更换新的批次。