- 移动端
上海抚生实业有限公司品牌商
9 年
手机商铺
商家活跃：
产品热度：
- NaN
- 0
- 0
- 2
- 2
全部产品
- 查看全部分类
- 标准品
- 抗体
- ELISA试剂盒
- PCR相关试剂
- 小鼠elisa检测试剂盒
- 兔elisa检测试剂盒
- 豚鼠elisa检测试剂盒
- 人elisa检测试剂盒
- 羊elisa检测试剂盒
- 犬elisa检测试剂盒
- 猫elisa检测试剂盒
- 绵羊elisa检测试剂盒
- 马elisa检测试剂盒
- 牛elisa检测试剂盒
- 大鼠elisa检测试剂盒
- 鸡elisa检测试剂盒
- 其它elisa检测试剂盒
- ATCC细胞
- 菌种
- 标准品
- 化工产品
- 脂肪酸类
- 化学试剂
- 生化试剂
- 试剂盒
- Elisa检测试剂盒
- 细胞
- 对照品/标准品
- RNA/DNA提取
- 原代细胞
- 培养基
- PCR检测试剂盒
- 美国DRG试剂盒
- 科研抗体
- 生化检测试剂盒
- 科研抗体
- 进口品牌
- 常用标准
- 标准滴定溶液
- XVB标准试液
- 标准指示液
- 生物染色液
- 标准缓冲溶液
- 元素标准溶液
- 纯化水检测试剂
- 锅炉水质分析
- 病理试剂
- 检测试剂
- 生物碱
- 黄酮
- 查尔酮
- 氧杂蒽酮
- 木脂素
- 香豆素
- 苯丙素
- 药物杂质及中间体
- 其它天然产物
- 蒽醌
- 其它醌类
- 甾体
- 二萜
- 其它萜类
- 环烯醚萜
- 倍半萜
- 其它酚类
- 三萜
- 进口检测试剂盒
- PCR试剂盒
- ELISA Kit
- 细胞生物学
- 耗材和仪器
- LAMP试剂盒
- 进口抗体
- FOR ELISA Kit
- PCR基因检测试剂盒
- 鉴定PCR试剂盒
- 进口PCR试剂
- B&I试剂盒
- 小分子试剂
- 细胞系
- 蛋白与多肽
推荐产品
公司新闻/正文
ELISA实验干货：样本处理及标本保存处理
284 人阅读发布时间：2025-07-15 11:42
ELISA，全称酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一种常用的免疫测定方法，用于检测和量化特定蛋白质或其他生物分子。该技术基于抗原与抗体之间的特异性结合，通过酶的催化作用放大信号，从而实现对目标分子的高灵敏度检测。
一、ELISA样本的处理
ELISA的检测目的是为了实验提供准确的实验依据，为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面的质量控制和全过程质量控制，在收集标本前都必须有一个完整的计划。
注意事项：
1、每个样本量收集体积=100ulx检测种类，如果要做复孔，标本量收集体积=100ulx检测种类x2
2、样本收集后若在一周内进行检测可保存于2-8°C，若不及时检测，请进行分装，冻存于-20°或-80°C，避免反复冻融
3、试剂盒的检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本。
4、血清标本采集是应注意避免溶血，红细胞溶解是会释放出具有过氧化物酶活性的物质，溶血标本可能会增加非特异性显色
5、为了保证尿液检测的准确性，必须正确收集尿液标本和保存，收集尿液的容器必须要清洁干燥，最好使用一次性的容器，避免因用药并清洁不到而造成的污染，尿液样本必须新鲜，留取后，应及时检测或保存
6、标本宜在新鲜是检测如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中可能发生聚合，间接法ELISA中乐视本底加深，
7、反复冻融会使蛋白效价降低，所以待测样本如需多次检测，宜少量分装冻存
二、标本类型
01、ELISA的常见标本
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如有沉淀形成，应再次离心
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成分时，用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，检测细胞内的成分时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右，通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成分。
5.组织标本：切割标本后，称取重量，加入一定量的PBS，PH7.4，用液氮迅速冷冻保存备用，标本融化后任然保持2-8°C的温度，加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，分装后一份待检测，其余冷冻备用，
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行试验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20°C保存，单应避免反复冻融。
一、ELISA样本的处理
ELISA的检测目的是为了实验提供准确的实验依据，为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面的质量控制和全过程质量控制，在收集标本前都必须有一个完整的计划。
注意事项：
1、每个样本量收集体积=100ulx检测种类，如果要做复孔，标本量收集体积=100ulx检测种类x2
2、样本收集后若在一周内进行检测可保存于2-8°C，若不及时检测，请进行分装，冻存于-20°或-80°C，避免反复冻融
3、试剂盒的检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本。
4、血清标本采集是应注意避免溶血，红细胞溶解是会释放出具有过氧化物酶活性的物质，溶血标本可能会增加非特异性显色
5、为了保证尿液检测的准确性，必须正确收集尿液标本和保存，收集尿液的容器必须要清洁干燥，最好使用一次性的容器，避免因用药并清洁不到而造成的污染，尿液样本必须新鲜，留取后，应及时检测或保存
6、标本宜在新鲜是检测如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中可能发生聚合，间接法ELISA中乐视本底加深，
7、反复冻融会使蛋白效价降低，所以待测样本如需多次检测，宜少量分装冻存
二、标本类型
01、ELISA的常见标本
- 液体类标本：血清、血浆、尿液、细胞上清、脑脊液等
- 培养细胞
- 组织标本
- 一般来说，再5天内测定的血清标本可放置于4°C，标本再冰箱中保存时间过长会导致血清IgG聚合，是间接法的试剂本底加深，超过一周测定的需-20°C保存，冻结血清溶解后，蛋白质局部浓缩，分不均，应充分混匀并避免产生气泡。
- 浑浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
- 测抗体的血清的标本如需保存作多次检测，以少量分装冰存。
- 保存血清只采集是就应注意无菌操作，也可加入适当的防腐剂，抗凝不完全的标本因纤维蛋白元的干扰而造成假阳性，建议劲量不使用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。
03、ELISA标本的处理
1、血清：室温血液私人凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如有沉淀形成，应再次离心
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成分时，用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，检测细胞内的成分时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右，通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成分。
5.组织标本：切割标本后，称取重量，加入一定量的PBS，PH7.4，用液氮迅速冷冻保存备用，标本融化后任然保持2-8°C的温度，加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，分装后一份待检测，其余冷冻备用，
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行试验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20°C保存，单应避免反复冻融。