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ELISA试剂盒选择需考虑的原则归纳

221 人阅读发布时间:2024-05-21 10:44

          ELISA全称为酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay ),是当前应用最为广泛的一项定性/定量检测抗体(抗原)的免疫酶技术。ELISA实验就是酶联免疫吸附实验是将抗原或抗体结合在固相载体表面,利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应,实现目标物检测的免疫分析方法,可测至皮摩尔(pmol)级别。
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    目前市场上的 ELISA 试剂盒质量参差不齐,试剂盒数以千计,供应商的科研实力也相差悬殊,试剂盒的质量好坏会严重影响到检测结果的准确性。因此如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要。

以下为归纳ELISA试剂盒选择需考虑的要素,供科研朋友们参考。
十大选择原则:
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1、基于研究物种选择

如果样品来自经典模型,如人、小鼠和大鼠,则可以相对轻松地找到经过验证的ELISA试剂盒。但如果样品来自猴子等非经典模型,则可获得的商品ELISA试剂盒数量有限。
如果要检测这些物种的指标,最好要对待检物(如有种属差异性)进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据进行分析。

2、基于分析目的选择
ELISA是一种可用于定性和定量分析的工具。定性ELISA为样品提供简单的阳性或阴性结果,而定量ELISA通过标准曲线反映样品中分析物的浓度。您想要量化样品中的分析物还是仅检测样品的存在与否?根据分析目的,您可以选择定性ELISA或定量ELISA

3、基于检测样本选择
大多数商业ELISA试剂盒在血清/血浆和细胞培养上清液中得到验证。请务必详细阅读产品说明书,以确保该产品与样品兼容。此外,其他因素如溶血和样品中脂质的存在会干扰分析性能。因此,在选择ELISA试剂盒之前,请考虑这些因素。建议对样品进行预实验,以验证试剂盒是否合适且对样品是否敏感。

4、基于检测范围选择
试剂盒的检测范围就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。
在此之前,我们可以通过NCBI的文献,uniprotpax-dab上给出的蛋白表达量参考值来比较ELISA试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致。

5、基于样本量选择
商业化试剂盒的样品用量通常需要10μL100μL, 如果您的样品很珍贵或较难获取,则需要认真考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,最好选择需要较少量样品的ELISA试剂盒。

6、基于文献引用选择
产品的文献引用特别是高质量的 SCI 文章的引用是很多客户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。

7、基于售前售后服务选择
在市场经济条件下,服务理念已逐渐被企业家所重视,企业的营销环境发生了巨大的变化,高科技的广泛应用,信息高速流动,产品硬件标准趋同。对客户所能提供的技术支持服务、问题处理的及时性、客户的满意度等也是选择产品的考虑因素。

8、基于美誉度选择
一个品牌不光要有知名度,更重要的是美誉度。从同行或实验室同僚了解供应商的口碑,也通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA试剂盒供应商,在一定程度上可以反映产品的质量问题。

9、基于成本预算选择
国际公认的知名品牌一般质量可靠,文献引用多。但国际品牌由于进口和国际运输等成本较高,因此售价也较高。其实优质国产品牌也是不错的选择,因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒相比价格上有较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格, 48T小包装,非常适合中国国情。

10、基于关键技术参数选择
如需选取新的 ELISA 试剂盒,首先需要仔细评估检测性能。重要参数包括灵敏度、动态范围以及精度,这些在多数的 ELISA 试剂盒说明书中都有体现。对于典型样品类型而言,其它参数对 ELISA 性能更具预测价值。


 

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