咋判断ELISA试剂盒好不好用？教你几招检测方法

质控维度

检测方法/标准

关键要求/说明

灵敏度 (Sensitivity)

检测限(LOD)：计算20份空白样本OD值的均值 + 3倍标准差

LOD越低越好，优质试剂盒可达5pg/ml甚至更低。

特异性 (Specificity)

交叉反应测试：检测试剂盒对结构相似物、代谢物或常见干扰物的反应

应尽可能无交叉反应，确保只识别目标分子。

精密度 (Precision)

批内CV%：同一批次试剂盒内重复检测同一样本

批间CV%：不同批次试剂盒间重复检测同一样本

批内CV% ≤ 15%，批间CV% ≤ 15%为优质水平。

准确度 (Accuracy)

回收率测试：在已知浓度样本中加入标准品，检测总浓度并计算回收率

回收率应在80%-120%之间，表明检测结果准确。

稳定性 (Stability)

加速破坏试验：将试剂盒置于4℃、-20℃储存，定期检测性能；进行多次冻融循环测试

试剂盒在有效期内性能稳定，经3次冻融后性能不变。

线性范围 (Linearity)

稀释线性测试：将高浓度样本按比例稀释，检测结果应与理论稀释倍数呈线性关系

线性回归R² > 0.99，确保定量结果可靠。