9 年
手机商铺
公司新闻/正文
30 人阅读发布时间:2025-12-29 09:10
细胞污染是细胞培养中最常见的问题之一,严重影响实验结果的可靠性。污染不仅会导致细胞死亡或状态异常,还可能造成交叉污染,使长期研究前功尽弃。因此,及时识别和处理污染至关重要。
常见的生物性污染包括细菌、真菌、支原体、黑胶虫、原虫、病毒以及非同种细胞(交叉污染)等。不同类型的污染在表现上各有特点,需通过多种手段综合判断。
污染类型的识别特征
以下为常见污染类型的典型表现:
|
污染类型 |
肉眼/培养基变化 |
显微镜下特征 |
对细胞影响 |
|
细菌 |
培养基浑浊、变黄,pH升高 |
黑色细沙状颗粒,可见游动 |
生长受抑制,快速死亡 |
|
真菌/霉菌 |
清亮或轻微浑浊,可能有丝状物 |
丝状、珊瑚状结构,部分呈芽孢形态 |
缓慢消耗营养,最终导致细胞死亡 |
|
支原体 |
通常无明显变化 |
倒置显微镜下不可见(<0.8μm) |
生长缓慢,DNA/RNA表达改变,难察觉 |
|
黑胶虫 |
不浑浊 |
低倍镜下黑色点状,高倍可见“小虫”游动 |
初期影响小,严重时影响增殖 |
|
原虫 |
轻微浑浊 |
大量细小点状物轻微活动 |
争夺营养,繁殖减慢,边缘不清晰 |
|
病毒 |
无明显变化 |
无法通过常规显微镜识别 |
可能引起细胞病变,影响疫苗安全性 |
|
交叉污染 |
无特异性变化 |
细胞形态与预期不符,生长速度异常 |
实验无效,数据不可靠 |
补充说明:支原体污染最难发现,因其缺乏细胞壁且体积微小,在普通倒置显微镜下不可见。许多血清未做支原体阴性检测,增加了感染风险。

检测方法推荐
1、肉眼观察:定期检查培养基是否浑浊、颜色是否改变,并注意是否有异味(无需开盖)
2、显微观察:使用倒置显微镜,先低倍后高倍观察细胞间是否存在异物及其运动情况。
3、PCR检测:特异性高,可用于检测支原体、病毒等难以观察的污染物。
4、专用试剂盒:如MycoAlert®等商业化产品,可快速检测支原体污染。
5、细胞克隆化:最可靠的方法之一,若克隆后代形态一致,则基本排除污染。
建议
养成每日观察习惯:每次进出培养箱都快速扫视每瓶细胞的状态。
区分“污染”与“杂质”:背景中的“脏东西”可能是器皿外灰尘或显微镜污渍,应先清洁设备再确认。
定期筛查支原体:建议每周或每批新血清使用前进行支原体检测。
严格无菌操作:避免同时操作多株细胞,使用独立耗材,防止交叉污染。