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57 人阅读发布时间:2025-12-25 09:11
PCR(聚合酶链式反应)实验对污染控制要求极高,不仅涉及试剂交叉污染,还可能接触生物样本、有害化学品及高温设备。因此,安全操作不仅是个人防护问题,更关系到检测结果的准确性与实验室整体运行安全。
安全操作要点
一、实验室分区管理:PCR实验室通常分为四个独立区域,防止扩增产物反向污染:
1、试剂准备区:配制试剂,远离其他区域。
2、样品处理区:核酸提取与加样。
3、扩增区:PCR仪运行区域。
4、分析区:电泳或荧光检测。
各区应有专用仪器、耗材和工作服,人员按单一方向移动,避免逆行。
二、生物安全防护
实验室应达到二级生物安全标准(BSL-2),配备生物安全柜、紫外灯等设施。
所有操作应在生物安全柜内进行,尤其是可能产生气溶胶的步骤(如开盖、混匀)。
使用后及时对台面、仪器进行紫外照射和清洁消毒。
三、压力与空气净化
实验室应保持负压状态,空气流向从清洁区流向污染区,防止有害物质外泄。
配备高效空气过滤器(HEPA),净化室内空气。

四、个人防护装备(PPE)
必须穿戴实验服、手套、口罩,必要时佩戴护目镜。
离开实验室前更换衣物并洗手。
五、化学品与废弃物处理
接触浓酸、浓碱、剧毒试剂(如EB染料、溴化乙锭)时需特别小心,操作在通风橱中进行。
感染性废弃物必须高压灭菌后再按医疗废物处理。
废液分类收集,不可随意倾倒。
六、仪器操作安全
PCR仪、离心机等设备需定期校准与维护。
离心前平衡样品,避免高速运转时震动损坏设备或造成伤害。
加热设备使用时注意防烫伤。
以下为PCR实验室主要安全规范汇总:
|
安全维度 |
具体措施 |
|
分区管理 |
设立试剂准备、样品处理、扩增、分析四区,单向流动 |
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生物安全等级 |
达到二级生物安全标准(BSL-2) |
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空气控制 |
保持负压,空气单向流出;配备HEPA过滤器 |
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个人防护 |
穿实验服、戴手套、口罩、护目镜 |
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气溶胶防控 |
使用生物安全柜;操作前后紫外消毒;避免剧烈震荡 |
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化学品安全 |
浓酸浓碱戴手套操作;剧毒品专柜存放、专人管理 |
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废弃物处理 |
感染性废物高压灭菌;废液分类回收 |
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仪器管理 |
定期校准PCR仪、离心机、加样器;记录维护情况 |
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应急预案 |
制定泄漏、火灾、受伤等应急处理流程 |
✅ 建议
所有新进人员必须接受专业培训,熟悉SOP文件与应急程序。
每日记录温湿度、紫外消毒时间、仪器使用状态等,确保可追溯。
定期开展内部质控与外部比对实验,持续改进管理体系。
如果你正在建立或优化PCR实验室流程,这些规范可作为基础框架参考。