如何防止细胞培养污染

细胞培养（cell culture）也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。细胞培养泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长。细胞培养过程很容易受到污染。
                                       

细胞培养污染的可能原因:
1. 可能原因很多，比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等。

3. 也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素）。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。除特殊要求外，建议培养基中添加双抗比较好。
                                              

总结实验室防止细胞培养污染:

1，从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2，操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有序摆放在超净台触手可及的地方，同时空留足够操作空间。

3，操作时，试剂不用尽量及时盖上盖子，移至操作区外围，尽量不要从开口容器上经过。

4，使用移液枪时，将容器倾斜以便于移液，切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况，要及时用酒精棉球擦拭，以免液体残留导致细菌滋生。

5，先取试剂、耗材，再取移液枪、安装枪头。很多人习惯先安装枪头，然后去拿试剂、耗材，殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。

6，向废液缸打废液时，需轻柔，以免造成水花四溅，污染枪头、枪体。实验结束，及时倒掉废液缸垃圾，冲洗之后喷洒酒精，放入超净台紫外照射杀菌。
                         
7，冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时，从液氮罐取出冻存管，轻拧盖子，以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处，在37度水浴锅中快速解冻，水面不可超过冻存管盖沿；不建议直接扔进水中，以免水渗入造成污染。操作过程中，对于那种模糊不清的、你不确定的有没有污染的，宁愿认为是有菌的弃掉！也不要心存侥幸！