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    上海

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    细胞库 / 细胞培养、试剂、实验室仪器 / 设备、技术服务、耗材

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培养基性能验证核心步骤,简单好操作,实验不踩坑

21 人阅读发布时间:2026-01-12 09:25

培养基是微生物检测和细胞培养的基础,其性能直接影响实验结果的准确性。因此,在投入使用前必须进行系统性验证,确保其无菌、成分正确且能有效支持目标微生物生长或抑制非目标菌。该过程涵盖从采购到使用的全链条质量控制。

验证步骤分解

1.购买与验收

选择通过质量管理体系认证的供应商,要求提供完整的质控文件(如成分表、pH值、有效期、安全数据等)。

到货后核对名称、批号、外观、保质期,并进行初步质量检测。

2.储存管理

干粉培养基应存放在阴凉干燥处,避免阳光直射;未开封可室温保存最长2年,开瓶后需防潮并在6个月内用完。

3.制备过程控制

使用电阻率30万Ω·cm的蒸馏水复水。

准确称量,加热溶解时充分搅拌,防止焦化。

按规定条件灭菌(通常为121℃、15分钟),并迅速冷却,避免过度灭菌破坏营养成分。

灭菌后调节pH至规定范围(一般在25℃下测定)。

4.性能测试 这是验证的关键环节,主要包括以下三类测试:

测试类型

测试方法/标准

目的说明

外观控制

观察颜色、澄清度,应无浑浊、无沉淀

初步判断培养基是否变质

污染控制

取部分培养基在适宜温度下培养7天,观察是否有微生物生长(即无菌试验)

确保培养基无外来污染

促生长能力

接种标准菌株(如白色念珠菌等),比较其在待测与对照培养基上的生长率

验证培养基能否有效支持目标菌生长

适用性检查

通过定量(如Miles-Misra法)、半定量或定性方法评估目标菌生长指数及非目标菌抑制情况

确认选择性培养基的功能有效性

注:促生长能力测试中,非选择性培养基的目标菌生长率应不低于0.7,选择性培养基则不低于0.12。适用性检查常使用ATCC或其他标准菌种进行。

培养基性能验证是一个多步骤的质量保证流程,必须涵盖采购验收规范储存标准化制备系统的性能测试四个主要阶段。其中,无菌性测试促生长能力验证是判定培养基能否投入使用的核心依据。只有全部指标合格,培养基方可用于正式实验或生产。

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