抗凝剂对血浆样本有什么影响
186 人阅读发布时间:2025-09-03 11:14
在ELISA实验中,抗凝剂用于防止血液样本在采集后凝固。常见的抗凝剂包括肝素、EDTA和柠檬酸钠。抗凝剂的选择应根据ELISA试剂盒的具体要求和实验目的来确定,因为不同的抗凝剂可能对某些检测指标有特定的影响。在处理ELISA样本时,必须遵循正确的抗凝剂使用指南,以确保实验结果的准确性和可靠性。抗凝剂对血浆样本的影响主要体现在以下几个方面:
一、抗凝剂的核心作用机制
1、抑制凝血过程
通过螯合钙离子(如EDTA)或抑制凝血酶活性(如肝素)阻止纤维蛋白形成,保持血浆液态。
肝素通过增强抗凝血酶III活性延长凝血时间(APTT检测需特别注意)。
2、样本稳定性提升
抗凝剂可延长血浆保存时间(EDTA-K2样本4℃可保存7天,肝素样本建议24小时内检测)。
防止凝血因子降解(如FVIII在未抗凝样本中半衰期仅2小时)。
二、样本纯净度
使用抗凝剂可以保持血液样本的纯净度,防止凝血因子和纤维蛋白原的干扰,这对于需要检测血浆中特定成分(如血浆蛋白、酶或代谢物)的实验尤为重要。
三、样本处理
在制备血浆样本时,使用抗凝剂后需要通过离心来分离血浆,这个过程可能会引入一些物理和化学的改变,需要在实验设计中加以考虑。
四、样本保存
抗凝剂有助于维持血液样本的稳定,使其在采集后到检测前的这段时间内不会发生凝固或降解,从而保证检测结果的可靠性。
五、检测结果一致性
不同的抗凝剂可能对某些检测项目产生不同影响,因此在进行特定的体外诊断试剂检测时,应选择不会干扰检测结果的抗凝剂。例如,肝素可能不适合用于某些依赖于钙离子的检测,因为它会与钙离子结合。
六、生物标志物研究
在血浆蛋白组学研究中,抗凝剂的选择和处理条件(如离心速度)对血浆样本的污染水平和蛋白质组谱有显著影响。例如,EDTA虽然适合于大多数血液学检查,但可能导致血小板和红细胞污染,而肝素则可能影响白细胞的分析。
常见抗凝剂对血浆样本的具体影响
| 抗凝剂类型 |
主要应用领域 |
对血浆样本的典型影响 |
解决建议 |
| EDTA-K₂ |
血常规、药代动力学分析 |
可引起假性高血糖,干扰钙离子、镁离子测定 |
控制浓度在1.5~2.2mg/ml血液 |
| 肝素 |
生化常规检测 |
导致假性低血糖,影响血脂、血糖测定 |
选择低浓度肝素,定期校准仪器 |
| 枸橼酸钠 |
凝血功能检测 |
稀释效应可能影响电解质结果 |
按1:9比例与血液混合 |
| 草酸盐 |
较少用于常规生化检测 |
导致钾离子外渗,干扰乳酸脱氢酶测定 |
避免用于电解质分析 |
综上所述,抗凝剂对血浆样本的影响是多方面的,正确选择和使用抗凝剂对于保证血液检测结果的准确性和可靠性至关重要。