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上海抚生实业有限公司
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胎牛血清制备主要步骤
人阅读 发布时间：2023-11-01 11:26
胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）是在生物医学研究和细胞培养中广泛使用的重要生物制品，它含有丰富的生长因子、蛋白质和其他生物分子，对细胞生长和增殖起着至关重要的作用。制备胎牛血清是一个复杂的过程，通常由专业的生物制品公司进行，以确保其质量和纯度。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时，将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉采血。和新生牛血清相比，胎牛血清显然产量低，成本高。
胎牛血清性能：
1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）
3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）
4、无菌检验 阴性
5、支原体检验 阴性
6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）
7、牛腹泻病毒 阴性
8、大肠杆菌噬菌体 阴性
9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线（接种浓度）最大增殖浓度≥2.5×106个/ml
细胞倍增时间 ≤15h
克隆率 ≥85%
1、采集胎牛血液
制备胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。这需要在专业场所进行，确保采集的胎牛来自健康且受监控的牧场。采集血液需要遵循伦理和动物福利的法规和标准。确保供体是5-8月龄的牛胚胎。
2、血液分离
采集的胎牛血液会经过离心分离，将血浆与血细胞分开。血浆中包含了胎牛血清的大部分有利于细胞体外生长和繁殖的营养成分，如蛋白质、生长因子和激素。
3、过滤和清理
分离后的血浆会经过过滤等步骤，以去除残留的细胞碎片和颗粒物。这有助于提高血清的质量和纯度，确保它不含有微生物或其他污染物。
4、灭菌
胎牛血清需要进行灭菌处理，以确保其中不含有微生物污染。常见的灭菌方法包括过滤、辐照（细胞治疗专用）等，这些方法可以有效地杀灭细菌、病毒和其他微生物。
以Ausbian进口特级胎牛血清为例：将经过初步检测合格的很多供体胎牛的粗血清，混合在一起，在低温条件下，经七次加压过滤，最后三次为0.1 µm无菌过滤处理，得到浅黄色，澄清，稍粘稠液体。同一批次血清质量上基本无差异。不同厂家一个批次产量差异较大，从100升到2000升不等。批次大，更利于试验的稳定和连续的可参照性。
5、质量控制
制备后的胎牛血清通常会经过一系列的质量控制测试，包括检测其对细胞培养的兼容性、生长因子和激素水平，以确保其质量符合要求。这些测试有助于验证血清的质量和生物活性。
6、分装和储存
制备后的胎牛血清会被分装到小瓶或小管中，并严格冷冻保存。这有助于防止血清中的成分降解或受到污染。储存温度通常为零下20摄氏度或更低，以确保血清的长期保存稳定性。
总之，制备胎牛血清是一个复杂的过程，需要专业的设备和技术。在实验室中，研究人员通常会从可靠的商业供应商购买胎牛血清，这些供应商生产的胎牛血清符合严格的质量标准，可以用于细胞培养和生物医学研究。正确使用和存储胎牛血清是确保实验成功的关键，因此研究人员应遵循供应商的建议和操作规程，以充分利用这一重要的生物制品。
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