大鼠Elisa试剂盒操作时注意事项：

1. 大鼠Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔OD值的），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5.严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

6.本试剂不同批号组分不得混用。

7.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.底物请避光保存。

大鼠Elisa试剂盒样本处理及请求：

1. 血清：室温血液天然凝固10-20分钟，离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保留过程中如呈现沉积，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的请求挑选EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保留过程中如有沉积构成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管搜集，离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保留过程中如有沉积构成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检查排泄性的成份时，用无菌管搜集。离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清。检查细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度到达100万/ml摆布。经过重复冻融，以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成，应再次离心。

5. 安排标本：切开标本后，称取分量。参加必定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷冻保留备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度。参加必定量的PBS（PH7.4），用手工或
匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟摆布（2000-3000转/分）。细心搜集上清。分装后一份待检查，其他冷冻备用。

6. 标本收集后尽早进行获取，获取按有关文献进行， ELISA试剂盒获取后应尽快进行实验。若不能马上进行实验，可将标本放于-20℃保留，但应防止重复冻融。