原代细胞震撼来临

                                                                  原代细胞震撼来临
当细胞传代时，使用低浓度的胰蛋白酶并在显微镜下密切监测细胞。此外，记得在胰蛋白酶消化后完全中和细胞中的胰酶，因为任何活性的胰蛋白酶都将损伤细胞。走过了春的旎旖，迎来了夏的蓬勃，是这般的缤纷着绚丽，灿烂着热烈。这夏天很美丽啊，承接着春的生机，蕴含着秋的成熟，展现了抖擞激荡着夏的精神。
下列步骤以单管冻存细胞进行培养的实验方案为例。
● 准备一烧杯37°C的水。
● 从液氮储存中取出一管细胞，注意保护手和眼睛。
● 拧松管盖1/4圈，等待10秒钟以释放螺纹中可能残留的液氮，再重新拧紧管盖。
● 将冻存管的下半部分置于37°C水浴中进行解冻，直至冻存管内仅剩余一小块冰芯，使细胞迅速解冻。
● 用消毒液擦拭管体外表面，再将其移至II级A型层流细胞培养通风橱中。
● 打开管盖，使用1 mL移液器上下吹打细胞悬液以分散细胞。
 
台盼蓝染色
● 从管中吸取20 uL细胞悬液，并将其稀释于20 uL台盼蓝溶液中。
● 使用血细胞计数板来确定每毫升悬液中的活细胞数。
● 将管中悬液（1 mL）稀释至产品说明中的推荐浓度。
● 将5 mL细胞悬液加入25 cm2培养瓶，或将15 mL细胞悬浮液加入75cm2培养瓶中。
● 摇匀培养瓶中的培养基以彻底分散细胞。许多类型的细胞都会迅速贴壁，如果没有在传代后即刻摇匀细胞，细胞可能生长不均匀。
● 在37°C、5% CO2/95%空气、湿度细胞培养箱中培养细胞。为了获得最佳结果，培养开始后至少在24小时之内不要扰动细胞。
是否可以对扩增后的细胞重新冻存？如果可以该如何操作？
当从细胞库购买的冻存或正处于增殖期的细胞，可对其进行扩增和重新冻存。不过，冻存操作可能会对细胞的生长状态有所影响。下列实验方案为大家提供了一份使用无蛋白成份的冻存培养基冻存细胞的基础指南。